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速看!少走實驗彎路~

若實驗效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保存實驗數(shù)據(jù),保留所用板條及未使用試劑,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:


1. ELISA加完所有試劑后,讀數(shù)所有孔都很弱或者沒有讀數(shù),陽性對照很弱,什么原因?
序號
                                            可能原因
                        解決方法
1不同種屬的試劑盒、不同批號的試劑混用確定種屬、使用同一批次試劑盒里面的試劑
2標準品有問題、標準品的處理方法有問題反思實驗步驟、注意單位和稀釋倍數(shù)、稀釋方法
3漏加酶結(jié)合物回顧是否加入。未加入重新試驗
4顯色液配置變質(zhì)更換新的顯色液
5終止液當作其他溶液使用每次加入之前檢查標簽是否一致
6洗滌液配置有誤按照說明書進行配置


2.  ELISA實驗標準曲線很好,樣本OD值太高或太低,什么原因?
序號
                      可能原因                               解決方法
1標準曲線選擇不合適選擇最佳的標準曲線擬合
2樣本含量太低,沒有被檢測到嘗試濃縮樣本或者使用高敏ELISA試劑盒
3樣本含量太高,超過標曲增加預(yù)實驗探索稀釋倍數(shù),確保樣本OD數(shù)值在標曲內(nèi)


3. 標準品最高點吸光值一般在3.0左右,但是已經(jīng)是5左右了,什么原因?

序號                      可能原因                             解決方法
1如果OD值絕對靠譜,那就是顯色過度按照顯色的情況,之前介紹的標準進行終止
2只做了單波長檢測可嘗試使用雙波長檢測


4. 顯色很弱或無色,什么原因?
序號         可能原因                             解決方法
1孵育時間太短保證充足的孵育時間
2實驗溫度不正確
使用推薦的實驗溫度(37℃)
3試劑體積不夠或漏加檢查吸液及加液過程,保證所有試 劑按順序足量添加
4稀釋不正確
5酶標記物失活或底物失效混合酶結(jié)合物和底物,通過迅速顯 色來檢查判斷


5. 讀數(shù)數(shù)值低,是什么原因?

序號        可能原因
                                  解決方法
1酶標儀設(shè)置不正確
在酶標儀上檢查波長及濾光片設(shè)置;提前打開酶標儀預(yù)熱


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