盡管ELISA測(cè)定操作步驟簡(jiǎn)單，但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻比較多。不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的結(jié)果！在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，洗板有兩種方法：【手工洗板】和【洗板機(jī)洗板】

【手工洗板】：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

【自動(dòng)洗板機(jī)】：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

讓我們一起看看洗板時(shí)操作要點(diǎn)有哪些呢：

1）洗滌需要20倍稀釋，配置時(shí)用新鮮無(wú)污染的蒸餾水或去離子水現(xiàn)配現(xiàn)用。洗液若有結(jié)晶應(yīng)待其溶解后配置。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

2）垂直倒液，重復(fù)3-5次，不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來(lái)倒液體。

3）倒液后將酶標(biāo)板放在吸水紙上拍干。用干凈的濾紙，不要用衛(wèi)生紙。（細(xì)小粉塵或碎屑容易吸附到孔底，導(dǎo)致洗板不干凈，結(jié)果偏高或偏低，重復(fù)孔的數(shù)值也會(huì)相差很大。

4）每孔加入350ul洗液，太多將溢出孔外污染相鄰的孔。（特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度孔流傳到低濃度孔或空白孔，其造成的交叉污染將無(wú)法洗掉，背景增高）

5）加入洗液浸泡1分鐘，洗板5次。（洗板時(shí)間太短，洗滌效果不佳。）延長(zhǎng)洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。