裸鼠γ干擾素（IFN-γ）ELISA檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè) 

                                                                       產(chǎn)品貨號(hào)：XZK-15250

【摘要】：干擾素（IFN-γ）是一種主要由T淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。該蛋白與IFN-β或各種IFN-α家族蛋白沒有明顯的同源性。成熟的IFN-γ以非共價(jià)連接的同質(zhì)體存在。人類IFN-γ具有高度的物種特異性，只在人類和靈長(zhǎng)類細(xì)胞中具有生物活性。IFN-γ最初是基于其抗病毒活性而被定性的。該蛋白還發(fā)揮抗增殖、免疫調(diào)節(jié)和促進(jìn)炎癥的活性，因此在宿主防御機(jī)制中很重要。IFN-γ誘導(dǎo)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，上調(diào)I類和II類MHC抗原、Fc受體和白細(xì)胞粘附分子的表達(dá)。它調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的效應(yīng)功能，影響異型轉(zhuǎn)換并增強(qiáng)B細(xì)胞分泌免疫球蛋白的能力。IFN-γ還能增強(qiáng)TH1細(xì)胞的擴(kuò)增，并可能是TH1細(xì)胞分化所必需的。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中IFN-γ含量。凡訂購(gòu)我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購(gòu)！

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被干擾素（IFN-γ）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的干擾素（IFN-γ）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

裸鼠γ干擾素（IFN-γ）ELISA檢測(cè)試劑盒組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)以新版說(shuō)明書為準(zhǔn)）

注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。 

樣本處理及要求：

【血清】：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【血漿】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【組織勻漿】：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

【細(xì)胞培養(yǎng)物上清】：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【其它生物標(biāo)本】：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)。

【樣品外觀】：樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融，標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。