兔白細胞介素4（IL-4）ELISA檢測試劑盒使用手冊 

                                                                       產品貨號：XZK-12511

【摘要】：白細胞介素4（IL-4）：主要由活化的T淋巴細胞、肥大細胞、嗜堿性粒細胞產生的一種多效性細胞因子。結構：人和小鼠的IL-4CDna均已克隆成功，并獲得了相應的重組產品。成熟的IL-4分子量為18~19KD的糖蛋白。功能：能夠促進B細胞增殖、分化；誘導IgG1和IgE產生；促進TH0細胞向TH2細胞分化；抑制Th1細胞活化以及分泌細胞因子；協同IL-3刺激肥大細胞增殖等。

【產品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中IL-4含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務，歡迎咨詢、訂購！

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被白細胞介素4（IL-4）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素4（IL-4）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

兔白細胞介素4（IL-4）ELISA檢測試劑盒組成：（檢測范圍請以新版說明書為準）

注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。 

樣本處理及要求：

【血清】：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【血漿】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【組織勻漿】：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

【細胞培養(yǎng)物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【其它生物標本】：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測。

【樣品外觀】：樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內檢測），或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

安全性：

1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：2-8℃

2.有效期：6個月