兔C肽（C-P）ELISA檢測試劑盒使用手冊 

                                                                       產(chǎn)品貨號(hào)：XZK-12438

【摘要】：C肽（C-Peptide）又稱連接肽，由胰島β細(xì)胞分泌，它與胰島素有一個(gè)共同的前體胰島素原。胰島素原裂解成1個(gè)分子的胰島素和1個(gè)分子的C肽，因此C肽與自身胰島素摩爾量是一致的。因?yàn)镃肽不容易被肝臟降解，因此測C肽就是測了胰島素的含量，能準(zhǔn)確反映胰島細(xì)胞的功能。在口服葡萄糖耐量試驗(yàn)的同時(shí)可抽血測定空腹血糖負(fù)荷后1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)的血清C肽水平，正常人在服糖60分鐘后C肽水平升高至基礎(chǔ)水平的3倍以上。1型糖尿病C肽水平極低，胰島功能減退者餐后C肽上升的幅度常低于3倍。對于接受胰島素治療的患者，用測定血中胰島素水平不能評價(jià)自身胰島功能，可以測定C肽水平來評價(jià)自身胰島β細(xì)胞功能。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中C-P含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備要點(diǎn)：

1. 準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標(biāo)儀、高速離心機(jī)、高精度加樣器及槍頭等等）

2. 按照生物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)條例，穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴乳膠手套做好防護(hù)工作

3. 使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4. 嚴(yán)格按照說明書的操作方法進(jìn)行操作。說明書以英文說明書為準(zhǔn)。

兔C肽（C-P）ELISA檢測試劑盒組成：（檢測范圍請以新版說明書為準(zhǔn)）

注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。 

操作步驟：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實(shí)驗(yàn)過程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

【說明】：電子版說明書僅供參考，實(shí)際操作請按照隨產(chǎn)品發(fā)送的印刷版說明書。中英文說明書可能會(huì)有不一致的地方請以英文說明書為準(zhǔn)。

安全性：

1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：2-8℃

2.有效期：6個(gè)月