微生物硝酸鹽還原酶（NAR）

ELISA檢測試劑盒使用手冊 

                                                                       產(chǎn)品貨號：XZK-16665

【摘要】：硝酸鹽還原酶（Nitrate Reductase，簡稱NR）是催化硝酸鹽還原成亞硝酸鹽的一種含鉬的黃素蛋白，屬于氧化還原酶類。根據(jù)存在形式和特性的不同，硝酸鹽還原酶在真核生物中已被發(fā)現(xiàn)存在多種形式，如NADH-specific硝酸還原酶（EC1.6.6.1）、NAD(P)H-bispecific硝酸還原酶（EC1.6.6.2）和NADPH-specific硝酸還原酶（EC1.6.6.3）等。硝酸鹽還原酶的主要功能是催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，這是硝酸鹽同化過程中關(guān)鍵的一步。在植物中，硝酸鹽還原酶位于細胞質(zhì)內(nèi)或細胞膜外，在硝酸鹽還原途徑中是限速因子。通過NADH和NADPH其中之一或兩者（雙功能）提供兩個電子催化反應(yīng)，使硝酸鹽轉(zhuǎn)換成亞硝酸鹽。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒用于檢測微生物中硝酸鹽還原酶（NAR）活性。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

（細菌處理方案）

細菌裂解液：

1、 收集細菌懸液，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基，用預(yù)冷的PBS潤洗3次。

2、加入適量的預(yù)冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細菌。通常6孔板一個孔的細菌量需要150~250μL PBS重懸。

3、 將樣品放入-20℃或-80℃，用高壓細菌破碎機或者使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復(fù)凍融幾次，使細菌充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎，以達到裂解的目的。

4、 4℃ 10000×g 離心10min，除去細菌碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。 

 需要但未提供的材料及耗材：

1、酶標(biāo)儀（建議儀器使用前提前預(yù)熱） 

2、精密移液器、吸頭、加樣槽 

3、蒸餾水或去離子水 

4、洗瓶或者自動洗板機 

5、37℃水浴鍋或恒溫箱 

6、EP 管 

7、無粉一次性乳膠手套 

【儲存條件及有效期】：

 1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期 6 個月。 

2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自 封袋，并將全部試劑放回 2-8℃冰箱。 

注意：試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實驗需求可分多次使用；使用 后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1 個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期 時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

微生物硝酸鹽還原酶（NAR）ELISA檢測試劑盒組成及其配置（檢測范圍請參考說明書）

試劑盒性能：

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2.  靈敏度：最低檢測濃度小于1.0U/L。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。