小鼠鳶尾素（Irisin）ELISA檢測試劑盒使用手冊 

                                                                       產(chǎn)品貨號：XZK-9961

【摘要】：鳶尾素（Irisin） 是一種由肌肉細胞在運動時分泌的激素，屬于肌因子（myokine）的一種。鳶尾素可誘導(dǎo)白色脂肪細胞轉(zhuǎn)化為棕色脂肪細胞，增加產(chǎn)熱和能量消耗，從而有助于減輕體重和改善代謝；鳶尾素通過激活A(yù)MPK通路和抑制mTOR通路，增強胰島素信號傳導(dǎo)，改善胰島素抵抗；它可激活成骨細胞，抑制破骨細胞活性，增強骨密度，預(yù)防骨質(zhì)疏松。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中的Irisin。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

檢測前準備工作：

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶完全溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

小鼠鳶尾素（Irisin）ELISA檢測試劑盒組成：（檢測范圍請以最新說明書為準）

操作步驟:

【試劑盒平衡至室溫】：從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

【標準品加樣】：設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

【加樣】：樣本孔先加待測樣本 10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL

【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

【洗滌】：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機洗板）。

【顯色】：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育15min。

【終止、測定】：每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD 值。

說明：

1.      由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。

2.      最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必準備充足的標本備份。

3.      不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。

4.      只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。