人鳶尾素（Irisin）ELISA檢測試劑盒使用手冊 

                                                                       產(chǎn)品貨號：XZK-4921

【摘要】：鳶尾素（Irisin） 是一種由肌肉細(xì)胞在運(yùn)動(dòng)時(shí)分泌的激素，屬于肌因子（myokine）的一種。鳶尾素可誘導(dǎo)白色脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)化為棕色脂肪細(xì)胞，增加產(chǎn)熱和能量消耗，從而有助于減輕體重和改善代謝；鳶尾素通過激活A(yù)MPK通路和抑制mTOR通路，增強(qiáng)胰島素信號傳導(dǎo)，改善胰島素抵抗；它可激活成骨細(xì)胞，抑制破骨細(xì)胞活性，增強(qiáng)骨密度，預(yù)防骨質(zhì)疏松。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中的Irisin。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

檢測前準(zhǔn)備工作：

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶完全溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人鳶尾素（Irisin）ELISA檢測試劑盒組成：（檢測范圍請以最新說明書為準(zhǔn)）

操作步驟:

【試劑盒平衡至室溫】：從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

【標(biāo)準(zhǔn)品加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

【加樣】：樣本孔先加待測樣本 10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL

【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

【洗滌】：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。

【顯色】：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育15min。

【終止、測定】：每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD 值。

說明：

1.      由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。

2.      最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3.      不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。

4.      只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。