植物褪黑素（MT）ELISA檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè) 

                                                                       產(chǎn)品貨號(hào)：XZK-11270

【摘要】：褪黑素（Melatonin，MT）是由腦松果體分泌的激素之一，又稱為松果體素、褪黑激素、褪黑色素。褪黑素合成后，儲(chǔ)存在松果體內(nèi)，交感神經(jīng)興奮支配松果體細(xì)胞釋放褪黑素。哺乳動(dòng)物褪黑素的合成受神經(jīng)系統(tǒng)的控制，該神經(jīng)系統(tǒng)路徑大致為：起源于下丘腦室旁核，直接或間接地投射到脊髓第一胸段的節(jié)前交感神經(jīng)元。接著通過(guò)頸上神經(jīng)節(jié)的節(jié)后交感神經(jīng)元的投影，形成錐體神經(jīng)的神經(jīng)纖維到達(dá)松果體調(diào)控褪黑素合成。褪黑素的分泌具有明顯的晝夜節(jié)律，白天分泌受抑制，晚上分泌活躍。褪黑素可抑制下丘腦-垂體-性腺軸，使促性腺激素釋放激素、促性腺激素、黃體生成素以及卵泡刺激素的含量均減低，并可直接作用于性腺，降低雄激素、雌激素及孕激素的含量。另外，MT有強(qiáng)大的神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)活性和清除自由基抗氧化能力，最終在肝臟中代謝，肝細(xì)胞的損傷可影響體內(nèi)MT的水平。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)植物標(biāo)本中的MT。凡訂購(gòu)我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購(gòu)！

樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)。

4.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

植物處理方案：

1、 新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心ィ鐭o(wú)液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可；

2、 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 請(qǐng)于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清；

4、 取上清檢測(cè)。 

注：標(biāo)本均應(yīng)密封保存，短期內(nèi)使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實(shí)驗(yàn)時(shí)間相隔較長(zhǎng)，務(wù)必保存在-20或-80度，盡量不要超過(guò)半年，同時(shí)避免反復(fù)凍融。

 需要但未提供的材料及耗材：

1、酶標(biāo)儀（建議儀器使用前提前預(yù)熱） 

2、精密移液器、吸頭、加樣槽 

3、蒸餾水或去離子水 

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī) 

5、37℃水浴鍋或恒溫箱 

6、EP 管 

7、無(wú)粉一次性乳膠手套 

【試劑盒儲(chǔ)存條件及有效期】：

 1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期 6 個(gè)月。 

2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自 封袋，并將全部試劑放回 2-8℃冰箱。 

注意：試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用；使用 后的剩余試劑盒建議在首次實(shí)驗(yàn)后 1 個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過(guò)期 時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

植物褪黑素（MT）ELISA檢測(cè)試劑盒組成及其配置（檢測(cè)范圍請(qǐng)參考說(shuō)明書）

操作注意事項(xiàng)：

1.  實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。 

4.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。

5.  建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

6.  建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購(gòu)經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。