羊弓形蟲抗體（Tox-Ab）ELISA檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè) 

                                                                       產(chǎn)品貨號(hào)：XZK-13231

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被羊弓形蟲（Tox）抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中羊弓形蟲抗體（Tox-Ab）的存在與否。

試劑盒性能：

準(zhǔn)確性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15，說(shuō)明試驗(yàn)結(jié)果有效。

特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

【儲(chǔ)存條件及有效期】：

 1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期 6 個(gè)月。 

2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自 封袋，并將全部試劑放回 2-8℃冰箱。 

注意：試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用；使用 后的剩余試劑盒建議在首次實(shí)驗(yàn)后 1 個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期 時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

 需要但未提供的材料及耗材：

1、酶標(biāo)儀（建議儀器使用前提前預(yù)熱） 

2、精密移液器、吸頭、加樣槽 

3、蒸餾水或去離子水 

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī) 

5、37℃水浴鍋或恒溫箱 

6、EP 管 

7、無(wú)粉一次性乳膠手套 

羊弓形蟲抗體（Tox-Ab）ELISA檢測(cè)試劑盒組成：

操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL；

3.  待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。